微生物生長曲線分析儀助力您的科研之路

發(fā)布時間：2023-06-17　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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OD600的應(yīng)用

　　OD600是指在600nm波長處的吸光度，常常被用于表示細(xì)菌液體培養(yǎng)液中的細(xì)菌濃度。在細(xì)菌連續(xù)培養(yǎng)過程中，在不同的時間點(diǎn)檢測菌液的OD600值，然后以時間為橫坐標(biāo)，OD600為縱坐標(biāo)，描繪細(xì)菌的生長曲線。結(jié)合生長曲線，可以評估細(xì)菌所處的生長階段，進(jìn)而可以確定合適的誘導(dǎo)表達(dá)或收獲的時間點(diǎn)。

應(yīng)用圖

OD600的檢測原理

　　菌液是一種非均相的懸濁液，當(dāng)入射光照射在菌液上時，光線被細(xì)菌(菌體)所散射，所以儀器檢測到的“吸光度”實際上是由散射和吸收綜合作用產(chǎn)生的，而不是如均相溶液中一般是由于溶質(zhì)分子光吸收引起的。

　　當(dāng)使用不同型號的設(shè)備來檢測同一樣本的吸光度時，可能會得到不同的OD600，這與儀器的光路設(shè)計有關(guān)。儀器的檢測器與樣本之間的距離(d)和檢測器的大小(R)都會對吸光度產(chǎn)生影響。如圖2所示，當(dāng)檢測器位于d1時，散射光可以被檢測器接收到，此時吸光度較小，而當(dāng)檢測器位于d2時，光不能被檢測器接收到，此時吸光度較大。

檢測原理

使用不同的設(shè)備檢測OD600

　　不同設(shè)備檢測到的OD600不能直接比較。如圖3所示，使用5個型號的設(shè)備(Biomat3，ND 2000 A，ND 2000 B，Genesys，Beckman DU530)分別對不同稀釋倍數(shù)(X1，X2，X5，X10)的樣本進(jìn)行OD600檢測。結(jié)果顯示不同的設(shè)備對同一樣本的OD600檢測值不一樣。如果需要比較不同設(shè)備間的OD600值，需要先確定相同樣品在不同設(shè)備上檢測得到的吸光度值之間的恒定偏差或者比率，然后進(jìn)行校準(zhǔn)。

使用不同的設(shè)備檢測OD600